? 正常情況下，融化后血清的外觀顏色應該是？
血清為動物來(lai)源，成分復(fu)雜，不同批(pi)次(ci)間(jian)會存在(zai)一些外觀上的差別。一般情況下，它(ta)們的顏色(se)可能是金黃色(se)、紅(hong)色(se)、琥珀棕色(se)或者是介(jie)于(yu)三(san)者之間(jian)。

? 血清應如何保存？
未(wei)拆(chai)封的(de)(de)(de)血清應存放于-15至(zhi)-20℃，避(bi)免反(fan)復凍(dong)融。拆(chai)封后的(de)(de)(de)血清應無(wu)菌分裝(zhuang)成一次的(de)(de)(de)用(yong)量(liang)(liang)并存放于-15至(zhi)-20℃，在(zai)產品質(zhi)量(liang)(liang)證書標識的(de)(de)(de)效(xiao)期(qi)內均可使用(yong)。2-8℃溶解(jie)后建議盡快使用(yong)。

? 血清的有效期是多久？
大部分康寧血清效期是5年，針對每個批次，請通過質檢文件確定具體效期日期。


? 血清應如何融解？
從(cong)冰箱中取(qu)出(chu)血清，放于2-8℃融(rong)(rong)化，融(rong)(rong)化過(guo)程中不時旋轉（swirling mix）混(hun)勻。充分(fen)融(rong)(rong)解后分(fen)裝或平衡(heng)到室溫(wen)后使用(yong)

? 為什么有時血清中出現絮狀沉淀？是否需要去除？如何去除？
多種原因可能導致(zhi)絮狀(zhuang)沉淀的(de)形成，最常見(jian)的(de)原因之(zhi)一(yi)是融(rong)化(hua)過程中，脂蛋白聚集所致(zhi)。該現象(xiang)一(yi)般不(bu)會影響產品質量。可以400g離心(xin)5分鐘，取上(shang)清(qing)，然后過濾(lv)(lv)。根據需要(yao)選擇(ze)合適(shi)的(de)濾(lv)(lv)膜孔(kong)徑(jing)，一(yi)般的(de)是0.22um PES材質的(de)濾(lv)(lv)膜。為(wei)避免濾(lv)(lv)膜阻塞，建議(yi)離心(xin)后取上(shang)清(qing)加入培(pei)養基內一(yi)起過濾(lv)(lv)而(er)不(bu)是直(zhi)接過濾(lv)(lv)血清(qing)。

? 為什么存放于冰箱中的血清會出現沉淀？如何避免該現象？
在2-8°C條件下存(cun)放，血(xue)清中的多種(zhong)蛋白或脂蛋白會(hui)形(xing)成肉(rou)眼可(ke)見的沉淀，如(ru)血(xue)纖蛋白（fibrin），單體時處于溶解狀態，在凍融(rong)過(guo)程中會(hui)發生聚集，形(xing)成肉(rou)眼可(ke)見的沉淀。但(dan)該現象一(yi)般(ban)不會(hui)影響血(xue)清的性能。可(ke)以(yi)400g離(li)心(xin)5分鐘(zhong)，取上(shang)清，然后(hou)過(guo)濾(lv)(lv)。根據需要選擇合(he)適的濾(lv)(lv)膜孔徑，一(yi)般(ban)的是0.22um PES材質(zhi)的濾(lv)(lv)膜。為避免濾(lv)(lv)膜阻(zu)塞，建(jian)議離(li)心(xin)后(hou)取上(shang)清加入培養基內一(yi)起(qi)過(guo)濾(lv)(lv)而不是直接過(guo)濾(lv)(lv)血(xue)清。為盡量避免出現上(shang)述現象，建(jian)議血(xue)清分裝(zhuang)成一(yi)次性用(yong)量存(cun)于-15°至-20℃冰箱，避免反復凍融(rong)和融(rong)化后(hou)的血(xue)清在2-8°C條件下長(chang)時間放置。

? 血清是否需要做滅活處理？
這取決于您的應用。
滅(mie)活過(guo)程中(zhong)(zhong)，會導致血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)某些(xie)成分(fen)被破壞，如(ru)氨基(ji)酸，維生(sheng)素，生(sheng)長因子(zi)等。所以(yi)(yi)只(zhi)有在(zai)您的(de)(de)(de)實(shi)(shi)驗對(dui)(dui)血(xue)(xue)清(qing)有特殊要求(qiu)時，才(cai)會考(kao)慮對(dui)(dui)血(xue)(xue)清(qing)進(jin)行滅(mie)活處理。如(ru)您的(de)(de)(de)實(shi)(shi)驗對(dui)(dui)血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)某種組(zu)分(fen)敏感，需要去除該組(zu)分(fen)。最常見的(de)(de)(de)情況(kuang)是需要去除血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)補(bu)體(ti)蛋白(bai)，因為(wei)補(bu)體(ti)在(zai)機體(ti)中(zhong)(zhong)參與細胞殺傷，巨噬細胞和(he)淋巴(ba)細胞活化，肥大細胞和(he)血(xue)(xue)小板組(zu)胺釋放，平滑(hua)肌(ji)收縮等過(guo)程，所以(yi)(yi)一般在(zai)免疫學(xue)相關研究中(zhong)(zhong)及肌(ji)細胞和(he)干細胞的(de)(de)(de)培養(yang)過(guo)程中(zhong)(zhong)需要對(dui)(dui)血(xue)(xue)清(qing)進(jin)行滅(mie)活處理。

? 如何進行血清滅活處理？
血(xue)清(qing)(qing)請先(xian)按(an)上(shang)述“血(xue)清(qing)(qing)應如何融解”中的(de)(de)操作步驟融化和混勻，熱滅活時(shi)請將血(xue)清(qing)(qing)置(zhi)于(yu)56℃水(shui)(shui)浴30分鐘。為盡量減少(shao)熱滅活對血(xue)清(qing)(qing)品質的(de)(de)影響，一次滅活的(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)體(ti)積(ji)不宜過大(da)。最(zui)好準備同樣的(de)(de)容器裝(zhuang)相(xiang)等(deng)體(ti)積(ji)的(de)(de)水(shui)(shui)（與血(xue)清(qing)(qing)相(xiang)同溫(wen)度(du)），滅活時(shi)將裝(zhuang)有血(xue)清(qing)(qing)和水(shui)(shui)的(de)(de)容器同時(shi)放入56℃水(shui)(shui)浴, 在裝(zhuang)水(shui)(shui)的(de)(de)容器中放置(zhi)溫(wen)度(du)計(ji)，加熱過程(cheng)中不時(shi)輕(qing)輕(qing)旋(xuan)轉(zhuan)混勻血(xue)清(qing)(qing)，當溫(wen)度(du)計(ji)顯示(shi)達到(dao)56℃左右(you)，開始計(ji)時(shi)。56 ℃水(shui)(shui)浴后(hou)，建議馬上(shang)轉(zhuan)移到(dao)冰上(shang)降溫(wen)。

? 為什么需要對血清進行gamma射線輻照？
gamma 射線輻照的目的是滅活血清中的病毒，一般情況下，25-40kGy和30-45kGy是常用的輻射劑量。


? 什么情況下需要無Ca2+/Mg2+離子的PBS？
取決于(yu)您的(de)(de)(de)研究應(ying)用(yong)。除(chu)了一些Ca2+/Mg2+會(hui)(hui)影(ying)響實驗(yan)結果的(de)(de)(de)實驗(yan)以外，一般在(zai)胰酶消化(hua)前(qian)，建(jian)議(yi)用(yong)無Ca2+/Mg2+離(li)子的(de)(de)(de)PBS清(qing)洗細(xi)胞，因為Ca2+/Mg2+會(hui)(hui)抑(yi)制胰酶活性。若消化(hua)后的(de)(de)(de)貼壁(bi)細(xi)胞需要繼續(xu)培養，建(jian)議(yi)消化(hua)后用(yong)含Ca2+/Mg 2+的(de)(de)(de)PBS清(qing)洗，因為Ca2+/Mg2+有助于(yu)細(xi)胞的(de)(de)(de)貼壁(bi)過(guo)程(cheng)。另(ling)外，若需要在(zai)緩沖液(ye)中(zhong)長(chang)時間(jian)保存(cun)細(xi)胞，也(ye)推薦使(shi)用(yong)含Ca2+/Mg2+的(de)(de)(de)PBS。

? 康寧無Ca2+/Mg2+離子的PBS和DPBS的區別是什么？
取決于您的(de)研究(jiu)應用。除了(le)一些Ca2+/Mg2+會影響實(shi)驗(yan)結(jie)果的(de)實(shi)驗(yan)以外(wai)，一般在(zai)胰酶消(xiao)(xiao)化(hua)前，建議用無Ca2+/Mg2+離子的(de)PBS清洗細(xi)胞(bao)，因(yin)為Ca2+/Mg2+會抑制(zhi)胰酶活性。若(ruo)消(xiao)(xiao)化(hua)后的(de)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)需要(yao)繼續培養，建議消(xiao)(xiao)化(hua)后用含(han)Ca2+/Mg2+的(de)PBS清洗，因(yin)為Ca2+/Mg2+有助于細(xi)胞(bao)的(de)貼(tie)壁過程。另外(wai)，若(ruo)需要(yao)在(zai)緩(huan)沖液(ye)中長時間保存細(xi)胞(bao)，也(ye)推(tui)薦使用含(han)Ca2+/Mg2+的(de)PBS。

? 康寧是否有注射級別（WFI）的水？
康(kang)寧(ning)細胞培養(yang)用(yong)(yong)水按照USP和/或EP 中對注(zhu)射用(yong)(yong)水（WFI）的(de)無(wu)菌要求進行(xing)質(zhi)控(kong)，但(dan)康(kang)寧(ning)的(de)該(gai)類產品(pin)為科(ke)研用(yong)(yong)產品(pin)，非臨床注(zhu)射用(yong)(yong)水。

? 用于消化的胰酶中加EDTA的原因是什么？
鈣(gai)離(li)子會(hui)抑制(zhi)胰酶活性，EDTA作為鈣(gai)離(li)子螯合劑，可以去除(chu)鈣(gai)離(li)子，有(you)助于(yu)胰酶更好發揮消(xiao)化細(xi)胞的功(gong)能

? 為什么在使用胰酶前要先清洗貼壁細胞？
目(mu)前大部(bu)分情(qing)況(kuang)下，細(xi)胞培養(yang)液中都含(han)(han)有一(yi)定量血(xue)(xue)清(qing)。血(xue)(xue)清(qing)中含(han)(han)有抑制胰酶(mei)活性的成分，如α1-antitrypsin 和α2-macroglobulin。建議使用無(wu)鈣鎂離(li)子的緩沖液清(qing)洗細(xi)胞。