CHANG Amnio羊(yang)水培養(yang)基使用說(shuo)明

原(yuan)代培養：原(yuan)位(wei)法

1. 將羊(yang)水低速離心以濃縮細胞。

2. 用少量病人(ren)自己(ji)的(de)羊水(shui)重懸(xuan)細(xi)胞(bao)顆粒。例如，將10ml羊水(shui)紡(fang)絲上清(qing)吸至細(xi)胞(bao)顆粒上方0.5mL，再懸(xuan)浮。在濃縮(suo)的(de)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液中加入足夠的(de)CHANG Amnio®，使(shi)最終鍍液體(ti)積為每個蓋片0.5mL(共4個蓋片)或每個小瓶2mL。

3.在37°C、5%-8%的CO2大(da)氣中不受干擾(rao)地(di)培養(yang)。

4. 第(di)2天(tian)淹水培養，加入2mL CHANG Amnio®。

5. 4 - 5天(tian)后，檢查(cha)培(pei)養物的(de)生(sheng)(sheng)長(chang)情況。一(yi)旦觀察到生(sheng)(sheng)長(chang)情況，應飼(si)喂(wei)培(pei)養物。去除(chu)所有培(pei)養上清，用2mL新鮮CHANG Amnio®替換培(pei)養物。建議以后每2天(tian)喂(wei)一(yi)次(ci)培(pei)養液。

6. 在第5天或之后檢查培養物的生長情(qing)況，當觀察到足夠的菌落時(shi)采摘。

7. 結(jie)果(guo)是在收獲(huo)前一天用(yong)CHANG Amnio進行培養。

原代培養：培養瓶法

1. 將羊水低(di)速離心以濃縮(suo)細胞。

2. 用(yong)少量(liang)病人自己的羊水重懸細(xi)胞(bao)顆粒(li)。例如，將10mL羊水紡絲上清吸(xi)至細(xi)胞(bao)顆粒(li)上方1mL，再懸浮。加入4mL CHANG Amnio，總體積為每瓶(ping)5mL。

3.在(zai)37°C、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地(di)培養。

4. 第5天檢(jian)查生(sheng)長情況。用新鮮羊膜更換(huan)培養基，如果觀察到(dao)足夠的細(xi)胞生(sheng)長就收割。

5. 檢查(cha)培養(yang)物的生長(chang)情況，此后每天更換培養(yang)基，直到(dao)觀(guan)察到(dao)足夠的菌(jun)落并準備收獲。

6. 結(jie)果是在收獲前(qian)一天用CHANG Amnio進(jin)行培養。

傳代培養

要傳代細胞，用胰蛋白(bai)酶(mei)(或pronase，等等)處理(li)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)物，就像你通常在傳統培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)細胞那樣。但是，應(ying)該仔細監(jian)測蛋白(bai)酶(mei)的(de)(de)處理(li)。在CHANG羊膜中(zhong)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)的(de)(de)羊水細胞對蛋白(bai)酶(mei)的(de)(de)敏感(gan)性(xing)高于(yu)在常規培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)的(de)(de)羊水細胞。可(ke)能有必要修(xiu)改您(nin)的(de)(de)協議(yi)以考(kao)慮到這一(yi)點。用于(yu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)的(de)(de)pH值必須(xu)在6.65-7.44之間(即培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)必須(xu)是微黃的(de)(de)鮭魚(yu)色)。pH值可(ke)以很容易地調整(zheng)，只需將(jiang)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)放在5%-8%的(de)(de)CO2培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)，輕(qing)輕(qing)松開蓋(gai)子約30分鐘。

注:羊(yang)膜(mo)常形成草酸鈣晶體。這些晶體的存在尚未被(bei)證(zheng)明會(hui)對產(chan)品性能(neng)造成任何不利(li)影響。

華雅思創生物集團——Irvine Scientific代理

上海華雅(ya)思創生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)科技有限公(gong)司(si)(si)是一(yi)家為生(sheng)(sheng)(sheng)命科學(xue)領域(yu)內的科學(xue)研究、細胞(bao)(bao)治(zhi)(zhi)療(liao)和生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)制藥相(xiang)關人(ren)(ren)員(yuan)提供優質產品(pin)和服(fu)(fu)務(wu)(wu)的生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)高科技公(gong)司(si)(si)，公(gong)司(si)(si)主辦的干細胞(bao)(bao)搜網(w w w.stemcell.so)為中國干細胞(bao)(bao)領域(yu)大資源(yuan)庫，網站提供：干細胞(bao)(bao)治(zhi)(zhi)療(liao)產品(pin)、細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養試(shi)劑耗材、臍帶(dai)MSC間(jian)充質干細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養基、IPS細胞(bao)(bao)ES胚胎干細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養基、DC細胞(bao)(bao)淋巴細胞(bao)(bao)無血清培(pei)(pei)養基、R&D細胞(bao)(bao)因子等種類豐富(fu)的產品(pin)；涉(she)及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等國際(ji)公(gong)司(si)(si)品(pin)牌和生(sheng)(sheng)(sheng)產廠家。以“Yes Service"核心服(fu)(fu)務(wu)(wu)理念，緊緊圍繞“Yes Service focus on Biology 越(yue)服(fu)(fu)務(wu)(wu) 專注生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)"打造(zao)中華民(min)族全(quan)新服(fu)(fu)務(wu)(wu)體(ti)系，我們(men)與客戶攜(xie)手一(yi)起探索生(sheng)(sheng)(sheng)命科學(xue)奧秘，解(jie)決人(ren)(ren)類健康問題，發展綠色(se)環保(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)態，推動世(shi)界和諧持續發展。