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支原體檢測你了解多少呢?

更新時間:2023-11-29

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支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)是(shi)細(xi)胞(bao)外生(sheng)存的小(xiao)微生(sheng)物(wu),是(shi)一類缺(que)乏細(xi)胞(bao)壁(bi)的原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)核細(xi)胞(bao)型微生(sheng)物(wu),呈高度多(duo)形(xing)(xing)性(xing),有(you)(you)球(qiu)形(xing)(xing)、桿(gan)形(xing)(xing)、絲狀(zhuang)、分枝狀(zhuang)等多(duo)種形(xing)(xing)態。它不(bu)(bu)同(tong)于(yu)細(xi)菌,也不(bu)(bu)同(tong)于(yu)病毒。從人體(ti)(ti)分離的16種支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)中,5種對人有(you)(you)致病性(xing),即(ji)肺炎支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)、解脲(niao)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)、人型支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti),生(sheng)殖支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)及發酵支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)等。支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)只能黏附(fu)在呼(hu)吸道(dao)或泌尿生(sheng)殖道(dao)的上皮細(xi)胞(bao)表面的受體(ti)(ti)上,而不(bu)(bu)進(jin)入組織(zhi)和(he)血(xue)液。目前(qian)診斷支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)感染用的是(shi)培養法(fa)、血(xue)清學(xue)檢測法(fa)和(he)基因診斷。

  分離培養法

  分離培養(yang)法(fa)是(shi)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測(ce)(ce)的金(jin)標(biao)方(fang)法(fa),其檢測(ce)(ce)準確度高。這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)是(shi)從可(ke)(ke)疑(yi)的細胞培養(yang)體(ti)系中取樣(yang),并(bing)接種(zhong)到適宜支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)生長(chang)的瓊脂(zhi)平板上。如果(guo)樣(yang)本(ben)中含有支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti),它們(men)就會在這(zhe)種(zhong)瓊脂(zhi)平板上*生長(chang),終(zhong)形成明顯可(ke)(ke)見(jian)的特征(zheng)性菌落(luo)。分離培養(yang)法(fa)基本(ben)不會出(chu)現假陰性結果(guo),因此被(bei)譽為支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測(ce)(ce)金(jin)標(biao)準。不過分離培養(yang)法(fa)也(ye)存在兩個弊(bi)端,一是(shi)檢測(ce)(ce)時(shi)間(jian)太長(chang),支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)要(yao)長(chang)出(chu)明顯克隆至少需要(yao)4周時(shi)間(jian)。二是(shi)盡管可(ke)(ke)以檢測(ce)(ce)絕大(da)多數支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)種(zhong)類(lei),分離培養(yang)法(fa)也(ye)有力所不及的時(shi)候。

  DNA檢測

  DNA 檢(jian)測(ce)(ce)需要將(jiang)可(ke)疑樣(yang)品與(yu)指示細(xi)(xi)(xi)胞(bao)共同培(pei)養,因此一般(ban)需要幾(ji)天時間。DNA檢(jian)測(ce)(ce)所用的(de)(de)指示細(xi)(xi)(xi)胞(bao)通常是細(xi)(xi)(xi)胞(bao)質區域(yu)較(jiao)大的(de)(de)Vero細(xi)(xi)(xi)胞(bao),如(ru)果原樣(yang)本中含有支原體,那么當細(xi)(xi)(xi)胞(bao)DNA被熒光(guang)染料(如(ru)Hoechst染料)染色時,就可(ke)以(yi)(yi)在(zai)指示細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)核周圍觀察到熒光(guang)斑(ban)點或熒光(guang)顆粒。分離培(pei)養法用來檢(jian)測(ce)(ce)支原體菌(jun)株并不可(ke)靠,而DNA法可(ke)以(yi)(yi)準確的(de)(de)將(jiang)其檢(jian)測(ce)(ce)出來。

  PCR法

  PCR 法(fa)也可以檢測(ce)(ce)菌株,PCR法(fa)檢測(ce)(ce)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)只(zhi)需幾個小時(shi),是不靈敏(min)的(de)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)檢測(ce)(ce)方(fang)(fang)法(fa)。該方(fang)(fang)法(fa)采(cai)用(yong)針對(dui)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)DNA的(de)引物用(yong)PCR檢測(ce)(ce)可疑樣(yang)本,其(qi)中PCR引物通(tong)常針對(dui)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)的(de)16S rRNA基(ji)因。在(zai)(zai)凝(ning)膠電泳過程(cheng)中,支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)DNA會顯示為特異(yi)性(xing)條帶,以此(ci)指示支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)的(de)存在(zai)(zai)。PCR法(fa)可以檢測(ce)(ce)大(da)多(duo)數(shu)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti),但謹(jin)慎起見可同時(shi)使用(yong)另一(yi)種檢測(ce)(ce)方(fang)(fang)法(fa)來進(jin)行驗(yan)證。

  酶學檢測(ce)和ELISA

  此外,也(ye)還存(cun)(cun)在(zai)(zai)一些其(qi)他支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)檢測方法(fa)。例如酶學檢測是將可(ke)疑樣本添加到特定底物中(zhong),在(zai)(zai)這一體(ti)(ti)系(xi)內支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)的(de)(de)(de)酶可(ke)以(yi)將ADP轉化為ATP,隨(sui)后(hou)能(neng)利用ATP發(fa)光的(de)(de)(de)luciferase酶就(jiu)可(ke)以(yi)指示支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)的(de)(de)(de)存(cun)(cun)在(zai)(zai)。ELISA也(ye)能(neng)用于支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)檢測,以(yi)ELISA法(fa)為基礎(chu)的(de)(de)(de)支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)檢測一般(ban)使用針對(dui)支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)16S rRNA基因(yin)的(de)(de)(de)帶標記探針或抗體(ti)(ti),來檢測培養物中(zhong)是否含有(you)支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)。

  定期檢測

  支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)感染(ran)會使培(pei)養(yang)細胞(bao)慢(man)慢(man)枯萎(wei),因此對培(pei)養(yang)細胞(bao)定期進行支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)非常重要。一般來說每1至3個(ge)月就應該進行一次支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)。將定期支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)常規化堅持下去,是細胞(bao)培(pei)養(yang)實驗室(shi)應對支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)感染(ran)的關鍵。

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產品描述

LONZA                 LT07-118                支原體檢測試劑盒

LONZA                 LT07-418                支原體(ti)檢(jian)測試劑(ji)盒

LONZA                 LT07-518                質控對照品

LONZA                 LT07-710                支原體檢測試劑(ji)盒

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