從導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短，可將轉染分為瞬時轉染和穩定轉染。

瞬時轉染（transient transfection）：指將構建(jian)好的(de)(de)質(zhi)粒(li)通過某種方(fang)式導入到(dao)哺乳(ru)動(dong)物細胞內，該質(zhi)粒(li)上的(de)(de)外源基(ji)因(yin)不整(zheng)合到(dao)細胞自身的(de)(de)基(ji)因(yin)組(zu)上。瞬(shun)時(shi)轉染的(de)(de)基(ji)因(yin)表(biao)達(da)是快(kuai)速且(qie)短暫的(de)(de)，通常只能維持幾天。這種轉染方(fang)式主要(yao)用于快(kuai)速檢測基(ji)因(yin)功能或蛋白質(zhi)表(biao)達(da)，例如(ru)了解基(ji)因(yin)沉默、抑制性RNA和小(xiao)規模蛋白質(zhi)生(sheng)產等。

穩定轉染（Stable transfected）：將外源DNA整(zheng)(zheng)合到宿主(zhu)細胞(bao)的(de)基因(yin)(yin)組中，這種(zhong)整(zheng)(zheng)合過程需要更(geng)長時間(jian)和更(geng)復(fu)雜的(de)操作。穩定轉(zhuan)(zhuan)染(ran)后的(de)基因(yin)(yin)表達(da)是(shi)長期(qi)且穩定的(de)，因(yin)(yin)為外源基因(yin)(yin)會被(bei)傳(chuan)遞給子代細胞(bao)。這種(zhong)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)方式主(zhu)要用(yong)于(yu)長期(qi)表達(da)目標基因(yin)(yin)的(de)實驗，例如生產重組蛋白、進行(xing)基因(yin)(yin)敲(qiao)除(chu)或(huo)敲(qiao)入等研究。穩定轉(zhuan)(zhuan)染(ran)也用(yong)于(yu)藥物篩選、研究形態變化、抗(kang)生素耐藥性(xing)等領域。

細胞轉染通常可分為三類途徑分別為物理介導、化學介導和生物介導。

物理介導：電(dian)穿孔法、顯微(wei)注射和基因槍等

化學介導：如經典的(de)磷酸鈣共沉(chen)淀法(fa)(fa)、脂質(zhi)體(ti)轉染方(fang)法(fa)(fa)和(he)多(duo)種陽離(li)子物質(zhi)介導技術等

生(sheng)物(wu)介(jie)導(dao)：病(bing)(bing)毒介導，逆轉錄病(bing)(bing)毒、腺病(bing)(bing)毒等

問題來了，該怎么選擇合適的轉染方法呢？

小編對這三(san)個途徑的常用方(fang)法進行了總結，記得給小編點個收藏hahaha~

物理介導——電穿孔(kong)法

原理：電流能夠擊(ji)穿(chuan)細胞(bao)膜形成(cheng)瞬時的水通路或膜上(shang)小孔促使DNA分子(zi)進入胞(bao)內。

優點：原理簡單；不需要載(zai)體。

缺點：需要特殊設備，電流對(dui)細胞(bao)傷害非(fei)常大。

化學介導——脂(zhi)質體轉(zhuan)染

原理：陽離(li)子脂(zhi)質體表面(mian)帶正電荷，與核酸(suan)的磷酸(suan)根通過(guo)靜(jing)電作用(yong)，將(jiang)DNA分子進(jin)行包裹，形成DNA脂(zhi)復合物，能被表面(mian)帶負電的細胞(bao)膜吸(xi)附(fu)，再通過(guo)細胞(bao)內吞進(jin)入細胞(bao)。

優點：操(cao)作(zuo)比較簡單(dan)，轉染效率高。

缺點：需要進行條件優化(hua)；有(you)些細(xi)胞體系(xi)不易轉(zhuan)染；對血清敏(min)感(gan)；價格較(jiao)高。

化學(xue)介導——陽離(li)子聚合物

原理(li)：與脂質體轉染(ran)原理(li)相似，都是利(li)用陽(yang)離子與核酸結合成復合物，利(li)用細胞內(nei)吞(tun)進(jin)入細胞內(nei)。

優點：在(zai)血清內穩定(ding)；對細胞毒性相對較低；轉(zhuan)染(ran)率高(gao)；性價比高(gao)。

缺點：需(xu)要對體(ti)系進行條件優化；有(you)些細胞體(ti)系不(bu)易轉(zhuan)染。

生物介導(dao)——病毒感染

原理：通過侵染宿主細(xi)胞從而將(jiang)外源基因導入(ru)到細(xi)胞中。

優點：高轉染率；適用(yong)性廣(guang)。

缺點：需(xu)要對體系進行條件優化；需(xu)要構建(jian)病毒載體，步驟較(jiao)為(wei)復雜。

然而，一種方法不會適用于所有的細胞和實驗，理想的轉染方法應該根據自己的細胞類型和實驗需求來選擇。合適的細胞轉染方法應具有高轉染效率，低細胞毒性和對正常生理學的影響最小，且易于使用和可重復性等特點。

細胞轉染效率往往受到很多因素的影響，從細胞類型、細胞培養條件和細胞生長狀態，到轉染方法的操作細節，都需要考慮，所以細胞轉染是一個常規但并不簡單的實驗。在進行轉染實驗時，需要注意以下事項：

細胞狀態：確保(bao)細胞(bao)處于良好的生(sheng)長狀態，并在(zai)轉染前處于指數(shu)生(sheng)長期。

轉染試劑選擇：根據(ju)細胞類型和實驗(yan)目的選擇(ze)適當的轉染試劑(ji)。

DNA/RNA質量：使(shi)用高質量的(de)DNA或RNA，并(bing)確保(bao)其大小(xiao)適宜。

轉染時間：根(gen)據細胞類型和轉染(ran)試(shi)劑確定最佳的轉染(ran)時間。

健康細胞培養物和操作：保持細胞健康，避免RNA酶和其他污染源的(de)污染。

純化RNA：在轉染前，使用適當的(de)方法純(chun)化(hua)RNA，以去除(chu)多余的(de)核苷(gan)酸、小的(de)寡核苷(gan)酸、蛋白和鹽離(li)子。

避免RNA酶污染：確(que)保(bao)實驗環境中沒(mei)有RNA酶，防(fang)止(zhi)對實驗結果產(chan)生影響。

重復實驗：為了確保實(shi)驗(yan)結果的(de)可(ke)靠(kao)性(xing)(xing)和可(ke)重(zhong)復(fu)性(xing)(xing)，需要進行多(duo)次(ci)重(zhong)復(fu)實(shi)驗(yan)。

轉染效率檢測：轉染(ran)完成后需(xu)要對轉染(ran)效率進行檢(jian)測，對實(shi)驗(yan)數據(ju)進行正確的(de)分析和(he)解釋，避免因誤判(pan)而(er)得出錯(cuo)誤的(de)結論。

覺得這款不合適？華雅還有更多轉染試劑，聯系客服了解！！！