產品英文名稱：Vero Cell HCP ELISA kit
產品(pin)中文名稱：Vero 細胞宿主蛋白免疫檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

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Vero Cell HCP ELISA kit產品介紹：
病(bing)毒疫(yi)苗(miao)或其它治療用蛋白(bai)在Vero細胞中(zhong)表(biao)達是(shi)商業用大量生(sheng)產(chan)(chan)藥物原料產(chan)(chan)品(pin)(pin)的經濟(ji)簡便方(fang)法(fa)。Vero Cell HCP ELISA試(shi)劑盒開發使用了不(bu)同終端產(chan)(chan)品(pin)(pin)和中(zhong)試(shi)樣品(pin)(pin)，４種不(bu)同疫(yi)苗(miao)產(chan)(chan)品(pin)(pin)是(shi)從疫(yi)苗(miao)生(sheng)產(chan)(chan)商獲得，包括全病(bing)毒疫(yi)苗(miao)和重組蛋白(bai)。Vero Cell HCP ELISA使用具(ju)有廣泛反應性，強吸附性的多克隆抗體，可(ke)以(yi)鑒定(ding)出所(suo)有Vero細胞系中(zhong)高(gao)度(du)保守的HCP。產(chan)(chan)品(pin)(pin)靈敏性強（zui低檢測(ce)濃度(du)達 0.7ng/mL）和具(ju)有高(gao)度(du)特異(yi)性，可(ke)以(yi)應用于任何在Vero細胞中(zhong)表(biao)達的蛋白(bai)產(chan)(chan)物。

§檢測原理：Vero Cell檢(jian)測(ce)(ce)是一(yi)個雙位點酶(mei)聯免(mian)疫檢(jian)測(ce)(ce)。樣本中(zhong)包(bao)含的(de)Vero Cell HCPs蛋(dan)(dan)白與(yu)標記有抗(kang)- Vero Cell抗(kang)體的(de)辣根過氧化物酶(mei)同時(shi)反應(ying)(ying)，反應(ying)(ying)發生在之(zhi)前涂有一(yi)層(ceng)吸附性抗(kang)- Vero Cell蛋(dan)(dan)白抗(kang)體的(de)微量(liang)滴定(ding)板中(zhong)進(jin)行。免(mian)疫反構成(cheng)為(wei)夾層(ceng)式結構：固相抗(kang)休-HCP-酶(mei)標記抗(kang)體。反應(ying)(ying)結束(shu)后(hou)清洗(xi)微量(liang)滴定(ding)板去除未結合反應(ying)(ying)物。添加TMB作(zuo) 用(yong)底物反應(ying)(ying)。微量(liang)滴定(ding)板讀(du)數器上測(ce)(ce)定(ding)水(shui)解物濃度(du)，水(shui)解物濃度(du)與(yu)Vero Cell HCPs蛋(dan)(dan)白濃度(du)成(cheng)比例。用(yong)提供的(de)標準液繪制標準曲線(xian)，根據讀(du)數可以(yi)計算出Vero Cell HCPs蛋(dan)(dan)白含量(liang)。

§檢測(ce)過(guo)程：取出所有試 劑平衡到室溫→分別移取50µl標準液，對照物和樣品至待測孔→移取100µl anti- Vero Cell:HRP(#F501)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350µl清洗緩沖液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不(bu)需搖床→加100µl反(fan)應(ying)終止液(ye)(#F006)→分光光度計(ji)450/650nm讀數(shu)

§結果分析：標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)可用于制作標準曲線，標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數據分析可以使用計算機選配曲線，例如點到點，三次樣本函數，或四參數邏輯曲線。不要(yao)使用(yong)線性回歸分析修改(gai)樣(yang)品(pin)吸光(guang)值，這樣(yang)會出現顯著(zhu)誤差。也可以手工繪圖，Y軸標注吸光(guang)值，X軸標注濃(nong)度(du)。然(ran)后根據(ju)樣(yang)品(pin)吸光(guang)值計(ji)算(suan)出樣(yang)品(pin)中HCP濃(nong)度(du)。（操作時每一濃(nong)度(du)標準液都(dou)要滴定到(dao)兩個小孔中，以便(bian)計(ji)算(suan)平(ping)均分光(guang)光(guang)度(du)值，樣(yang)品(pin)也需(xu)計(ji)算(suan)平(ping)均吸光(guang)值）。

Vero Cell HCP ELISA組成成份：
● Anti- Vero Cell:HRP(辣根過氧化物酶標記)　          1x12mL   F501(Product#)
● Anti- Vero Cell coated微量滴定板　                       12x8孔　  F502
● Vero Cell HCP標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)   1mL/瓶　 F503
● Stop Solution終止液(0.5N硫磺酸)  　　　             1x12mL　 F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯苯氨)　                             1x12mL　 F005
● Wash Concentrate清(qing)洗(xi)物(20倍濃縮)　                   1x50mL   F004

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