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產品英文名稱:CHO HCP ELISA kit, 3G
產品中文名稱:CHO HCP酶聯免疫分析試劑盒
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CHO HCP ELISA 試劑盒 產品介紹:
CHO HCP是第三(san)代ELISA試(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒,比之(zhi)前試(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒具有(you)更廣泛(fan)HCP反應性。新型試(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒在檢(jian)測CHO HCPs 蛋(dan)白(bai)方面有(you)很多改進。新試(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒具有(you)更高的(de)靈敏度,在抗體物和其它CHO表達(da)蛋(dan)白(bai)中檢(jian)測HCP蛋(dan)白(bai)可以精(jing)確到到十億(yi)分之(zhi)一百。第三(san)代ELISA試(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒經(jing)過大 量(liang)藥物原料和中試(shi)(shi)樣品檢(jian)測評(ping)估(gu),是工藝開發(fa)和大量(liang)釋放試(shi)(shi)驗(yan)檢(jian)測的(de)通(tong)用(yong)(yong)方法(fa)。抗體反應性使用(yong)(yong)傳(chuan)統2D 蛋(dan)白(bai)雜交(jiao)技術(2D HPLC-ELISA)鑒定。2D HPLC-ELISA方法(fa)顯示抗體對(dui)超過750種HCPs都具有(you)反應性。用(yong)(yong)蛋(dan)白(bai)檢(jian)測方法(fa)和ELISA正交(jiao)試(shi)(shi)驗(yan)表明(ming)這(zhe)些多達(da)750種的(de)宿(su)主細(xi)胞(bao)蛋(dan)白(bai)意味(wei)著(zhu)高 于98%的(de)蛋(dan)白(bai)種類均可用(yong)(yong)ELISA方法(fa)檢(jian)測到。因此(ci),這(zhe)種抗體可以避(bi)免(mian)丟失任何重要的(de)HCP蛋(dan)白(bai)。
產品使用(yong)時一定(ding)要(yao)做好保護措施(shi):0.5M硫磺(huang)酸有(you)強腐蝕性,要(yao)避(bi)免接觸眼(yan)睛、皮膚和衣物。檢測前所有(you)試劑都(dou)要(yao)平衡到室溫。
§檢(jian)測原理:CHO檢測 是(shi)一(yi)個雙位點酶聯免疫檢測。樣本中包含的(de)CHO HCPs蛋白與(yu)標記有抗(kang)(kang)-CHO抗(kang)(kang)體(ti)的(de)辣根過氧化(hua)物(wu)(wu)(wu)酶同時反(fan)應(ying)(ying)(ying),反(fan)應(ying)(ying)(ying)發生在之前涂(tu)有一(yi)層(ceng)吸附性抗(kang)(kang)-CHO蛋白抗(kang)(kang)體(ti)的(de)微量(liang)滴定板中進(jin)行(xing)。免疫反(fan)應(ying)(ying)(ying)構(gou)成(cheng)為夾層(ceng) 式(shi)結(jie)構(gou):固相抗(kang)(kang)休-HCP-酶標記抗(kang)(kang)體(ti)。反(fan)應(ying)(ying)(ying)結(jie)束(shu)后(hou)清洗(xi)微量(liang)滴定板去除未結(jie)合反(fan)應(ying)(ying)(ying)物(wu)(wu)(wu)。添加TMB作(zuo)用底物(wu)(wu)(wu)反(fan)應(ying)(ying)(ying)。微量(liang)滴定板讀數器上測定水(shui)解物(wu)(wu)(wu)濃(nong)度(du)(du),水(shui)解物(wu)(wu)(wu) 濃(nong)度(du)(du)與(yu)CHO HCPs蛋白濃(nong)度(du)(du)成(cheng)比例(li)。用提供的(de)標準(zhun)液繪制標準(zhun)曲線,根據讀數可以(yi)計算出(chu)CHO HCPs蛋白含量(liang)。
§檢(jian)測過程:取出所有試 劑平衡到室溫→移取100µl anti-CHO:HRP(#F551)至每孔→分別移取50µl標準液,對照物和樣品至待測孔→密封滴定板,搖床室溫溫育2小時,180rpm→清空小 孔,用紙吸干殘留液,350µl清洗緩沖液清洗4次→加100µl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘,不需搖床→加100µl反應(ying)終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數
§結(jie)果分析:標準液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標準曲線,標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數據分析可以使用計算機選配曲線,例如點到點,三次樣本函數,或四參數邏輯曲線。不要使(shi)用線性回歸分(fen)析修(xiu)改樣品吸(xi)光值,這(zhe)樣會出現顯(xian)著誤差(cha)。也(ye)(ye)可以(yi)手工(gong)繪圖,Y軸標注吸(xi)光(guang)值,X軸標注濃(nong)度(du)。然后(hou)根據樣品吸(xi)光(guang)值計算出樣品中HCP濃(nong)度(du)。(操作時每一(yi)濃(nong)度(du)標準液都要重復滴定(ding)到兩個小孔中,以(yi)便計算平均(jun)分光(guang)光(guang)度(du)值,樣品也(ye)(ye)需計算平均(jun)吸(xi)光(guang)值)。
CHO HCP ELISA組成成份:
● Anti-CHO:HRP(辣根過氧化物酶) 1x12mL F551(Product#)
● Anti-CHO微量滴定板 12x8孔 F552
● CHO HCP標準液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL) 1mL/瓶 F553
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸) 1x12mL F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯苯氨) 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮) 1x50mL F004
需自備物:
? 微量板分光光度計,雙波長450 & 650nm
? 移液器-50L and 100L
? 可重復使用或多通道移液器-100L
? 微量板搖床(150 - 200 rpm)
? 樣品稀釋液(*使用Cat # I028)
? 1L清洗瓶
? 蒸餾水
2015年統統*,--一切活動盡在上海華雅(ya)思創!
StemRD MGro-500 MSC medium,chemically-defined,間充質干(gan)細胞培養基 500mL/瓶(ping)
LONZA 04-418Q X-VIVO 15 無血(xue)清(qing)培養(yang)基 1L/瓶
Life Technology 087-0112DK AIM-V® CTS™ 無(wu)血清細(xi)(xi)胞培養基(ji)(細(xi)(xi)胞治療級) 1000mL/瓶
Pall 15950-017 Ultroser Serum Substitute 血清替代品 20mL/瓶
LONZA 12-725F UltraCULTURE Serum-free Medium無血清培養基 500mL/瓶(ping)
BD 762165 PAXgene Blood RNA Tube RNA樣本收集管 100管/盒(he)
LONZA 50150 SeaKem® Gold Agarose 金瓊脂糖粉 125g/瓶(ping)
LONZA CC-3162 EGM-2 BulletKit( CC-3156 & CC-4176 )套裝 Kit/套
Nunc 159910 175cm2易用培養瓶(ping),PS,已(yi)滅菌,瓶(ping)蓋:過(guo)濾蓋 30個/箱
LONZA LT07-318 MycoAlert® Mycoplasma Detection Kit支原(yuan)體檢測試劑盒(he) 100Tests/盒(he)
LONZA LT07-418 MycoAlert® Mycoplasma Detection Kit支(zhi)原體檢測試劑盒 50Tests/盒
Lonza 50-650U Kinetic-QCL 192 Test Kit內(nei)毒素檢測試劑(ji)盒(he) 192T/盒(he)
Corning 431080 175cm⒉細胞培養(yang)瓶,Angled頸,透氣蓋 50個(ge)/箱
Corning 8388 125mL儲(chu)液瓶(ping) Storage Bottles,PS,45mm瓶(ping)頸,帶蓋,滅(mie)菌(jun),獨立包(bao)裝 24個/箱
Corning 430659 2ml凍(dong)存管, 聚丙烯,外旋蓋, 可自立圓底 500個/箱
Corning 3290 75cm2 CellBIND Surface培(pei)養瓶,已滅菌,透(tou)氣蓋 100個/箱
Corning 3292 175cm2 CellBIND Surface培(pei)養瓶,已滅菌,透(tou)氣蓋 50個(ge)/箱
BD-Falcon 352360 Cell Strainer, 100µm, Yellow 100um細胞濾(lv)網(wang) 50個/箱
BD Falcon 352070 50mL錐(zhui)形離(li)心管(guan),高(gao)透明度聚丙烯,袋裝 500支/箱
BD Falcon 352096 15mL錐形離心管,高透(tou)明度聚丙烯,袋裝(zhuang) 500支(zhi)/箱
BD BioCoat 354234 Matrigel Basement Membrane Matrix(標準型) 10mL/瓶
Cygnus F550 CHO HCP ELISA Kit,3G宿主蛋白檢測試(shi)劑盒 96T/盒
Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 大(da)腸桿菌 96T/盒
Nalgene 5100-0001 Cryo 1℃ Freezing Container梯(ti)度(du)降溫(wen)凍存盒 1個/箱
Nalgene 5026-0909 CryoBoxes 凍存盒(he) 9X9 陣列(lie),管瓶1.2/2.0mL 24個/箱
Nalgene 2250-0130 50L 可高(gao)溫高(gao)壓操作的細口大瓶(帶手柄) 1個/箱(xiang)
Nalgene 2319-0050 20L 可高(gao)溫高(gao)壓滅(mie)菌的細(xi)口(kou)大瓶(帶放水口(kou)) 1個(ge)/箱
Hyclone SH30084.03 FBS 優等澳洲胎牛血清 500mL/瓶
PeproTech 100-18B-500 Recombinant Human FGF-basic (154 a.a.)因子(zi) 500ug/支(zhi)
Parafilm PM-996 Parafilm® M Laboratory Film 封口膜(mo) 12卷/箱
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