產品名稱：Beyotime RIPA裂解液(強)

產(chan)品貨號：P0013B

英(ying)文名稱：RIPA Lysis Buffer

產品(pin)規格：100ml

產品介紹：

碧云天生(sheng)產的RIPA裂解(jie)液(ye)(ye)(RIPA Lysis Buffer)是(shi)一種傳(chuan)統(tong)的細胞組(zu)織快速裂解(jie)液(ye)(ye)。RIPA裂解(jie)液(ye)(ye)裂解(jie)得到的蛋白樣品(pin)可以用于(yu)常規的PAGE、Western、免(mian)疫沉淀(dian)(immunol precipitation，IP)、免(mian)疫共沉淀(dian)(co-IP)和(he)ELISA等。

本產品可以用(yong)于動物、植(zhi)物的細(xi)胞或組(zu)織樣品，也可以用(yong)于真菌或細(xi)菌樣品。RIPA裂解(jie)液的配方有很(hen)多種，根(gen)據其(qi)裂解(jie)液的強度大致可以分為(wei)強、中、弱三類(lei)。

RIPA裂解液(強)的(de)主要(yao)成(cheng)分為50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多種(zhong)抑(yi)(yi)制(zhi)劑。可(ke)以有效抑(yi)(yi)制(zhi)蛋白降解。

產品應用(yong)：

本產品可(ke)以(yi)用(yong)于動(dong)物、植物的(de)細(xi)胞或組(zu)織樣(yang)品，也可(ke)以(yi)用(yong)于真菌或細(xi)菌樣(yang)品的(de)組(zu)織裂解。

產品使(shi)用說明：

a.把組織切成細小的碎片。

b.融(rong)解RIPA裂解液，混勻(yun)。取(qu)適當(dang)量的裂解液，在使用前數(shu)分鐘內加入(ru)(ru)PMSF，使PMSF的最終(zhong)濃度(du)為1mM，或者根據實(shi)驗需要加入(ru)(ru)適當(dang)的上述蛋白酶磷酸酶抑制(zhi)劑混合(he)物。

c.按(an)照(zhao)每20毫克組織加入150-250微升裂解(jie)(jie)液的(de)比例加入裂解(jie)(jie)液。(如果裂解(jie)(jie)不充(chong)分可以(yi)適當(dang)添加更多的(de)裂解(jie)(jie)液，如果需要(yao)高濃度的(de)蛋白樣品，可以(yi)適當(dang)減少(shao)裂解(jie)(jie)液的(de)用量(liang)。)

d.用(yong)玻璃勻漿(jiang)器勻漿(jiang)，或使(shi)用(yong)碧云天生(sheng)產的(de)E6600 TissueMaster™手持式組織研(yan)磨儀研(yan)磨，直至充分(fen)裂解(jie)。也可以把組織樣品冷凍后液氮(dan)研(yan)磨，研(yan)磨充分(fen)后加入裂解(jie)液進(jin)行裂解(jie)。

e.充分裂解(jie)后(hou)，10000-14000g離心3-5分鐘(zhong)，取上(shang)清，即可進行(xing)后(hou)續的(de)PAGE、Western和(he)免(mian)疫(yi)沉(chen)淀(dian)等操作。每20mg凍(dong)存(cun)的(de)小鼠肝臟組織(zhi)用200微升本裂解(jie)液裂解(jie)后(hou)獲得的(de)上(shang)清，其蛋白濃度約為15-25mg/ml，不(bu)同(tong)(tong)狀態的(de)不(bu)同(tong)(tong)組織(zhi)有所(suo)不(bu)同(tong)(tong)。

f.如果(guo)組織樣(yang)(yang)品本身非常細(xi)小(xiao)，可以適當剪切(qie)后(hou)直(zhi)(zhi)接加入裂(lie)解(jie)(jie)液(ye)裂(lie)解(jie)(jie)，通過強烈(lie)vortex使樣(yang)(yang)品裂(lie)解(jie)(jie)充分(fen)。然(ran)后(hou)同(tong)樣(yang)(yang)離心取(qu)上清(qing)，用于后(hou)續(xu)實(shi)驗。直(zhi)(zhi)接裂(lie)解(jie)(jie)的優點(dian)是比較方便(bian)，不必使用勻漿器或(huo)研(yan)磨(mo)設備，缺點(dian)是不如勻漿或(huo)研(yan)磨(mo)那樣(yang)(yang)裂(lie)解(jie)(jie)得比較充分(fen)。

注：RIPA裂解液的裂解產物(wu)中經常會出現(xian)一小團透明膠狀物(wu)，屬正常現(xian)象(xiang)。該透明膠狀物(wu)為(wei)含有基(ji)因(yin)組(zu)(zu)DNA等(deng)的復合物(wu)。在不(bu)檢(jian)測和基(ji)因(yin)組(zu)(zu)DNA結合特別(bie)(bie)緊(jin)密(mi)的蛋(dan)白(bai)的情況下，可以直接離心(xin)取上(shang)清用于后(hou)續實驗(yan)；如(ru)果(guo)(guo)需要檢(jian)測和基(ji)因(yin)組(zu)(zu)結合特別(bie)(bie)緊(jin)密(mi)的蛋(dan)白(bai)，則(ze)可以通(tong)過超聲處理打碎打散該透明膠狀物(wu)，隨后(hou)離心(xin)取上(shang)清用于后(hou)續實驗(yan)。如(ru)果(guo)(guo)檢(jian)測一些(xie)常見(jian)的轉(zhuan)(zhuan)錄因(yin)子，例如(ru)NF-kappaB、p53等(deng)時，通(tong)常不(bu)必進行超聲處理，就可以檢(jian)測到這些(xie)轉(zhuan)(zhuan)錄因(yin)子。

產品特點(dian)：

1.特殊(shu)的抗(kang)氧(yang)化(hua)劑有效地(di)抑制樣(yang)品在檢(jian)測(ce)過程中產生(sheng)新的MDA，使檢(jian)測(ce)更加(jia)準(zhun)確。同時本檢(jian)測(ce)試劑盒在檢(jian)測(ce)過程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二(er)醛分解成MDA，使對(dui)脂質(zhi)氧(yang)化(hua)的測(ce)定更加(jia)準(zhun)確。

2.本試劑(ji)盒可(ke)以檢(jian)測(ce)低達1μM的MDA，也可(ke)檢(jian)測(ce)高達200μM的MDA在(zai)本試劑(ji)盒的檢(jian)測(ce)范圍內(nei)，可(ke)以直接用(yong)本試劑(ji)盒檢(jian)測(ce)血漿、血清、尿液樣品等。

保存條(tiao)件：

-20℃保存，一年有效。

產品訂購信息(xi)：

產品名稱：Beyotime RIPA裂解液(強)

產品貨號(hao)：P0013B

關于公(gong)司(si)：

Beyotime創(chuang)辦于(yu)2001年(nian)(nian)。近20年(nian)(nian)來專注于(yu)自主(zhu)研發(fa)和(he)生產。2007年(nian)(nian)成立上海碧云(yun)天(tian)生物(wu)技(ji)術有限公(gong)司(si)，為(wei)特(te)新(xin)(xin)“小(xiao)(xiao)巨(ju)人"企(qi)(qi)(qi)業，并進一步入(ru)選第(di)二批第(di)一年(nian)(nian)建議(yi)支(zhi)持(chi)的專精(jing)(jing)特(te)新(xin)(xin)“小(xiao)(xiao)巨(ju)人"企(qi)(qi)(qi)業， 也是G60科創(chuang)走廊一類重點扶(fu)持(chi)企(qi)(qi)(qi)業和(he)上海市專精(jing)(jing)特(te)新(xin)(xin)中小(xiao)(xiao)企(qi)(qi)(qi)業。江(jiang)蘇(su)碧云(yun)天(tian)為(wei)江(jiang)蘇(su)省優(you)良企(qi)(qi)(qi)業，南通市雙創(chuang)優(you)企(qi)(qi)(qi)。公(gong)司(si)主(zhu)要研發(fa)生產生物(wu)、醫(yi)學研究用(yong)試(shi)劑(ji)、試(shi)劑(ji)盒、消耗品(pin)和(he)儀器設備。

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