蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)樣品制備中，在細(xi)胞(bao)破碎之后，既可(ke)以利用特定蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質的(de)(de)特性來(lai)分離某(mou)一(yi)(yi)類蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)質，比如(ru)親和純化(hua)，比如(ru)前(qian)面介紹的(de)(de)磷(lin)酸(suan)化(hua)蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)富集，或(huo)者膜蛋(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)富集；另外一(yi)(yi)個考(kao)慮方向是去除(chu)雜質----去掉樣品中某些非目標高豐度蛋白或者雜質的干擾，同樣可以達到簡化樣本的目的。當然要小心“倒洗腳水的時候別把嬰兒也倒掉了"，一定要選擇可靠的產品。

比如，潛在(zai)疾病(bing)標(biao)志物的最好(hao)樣本(ben)(ben)來(lai)源就(jiu)是血(xue)清或其他體(ti)液(ye)，此(ci)類(lei)樣本(ben)(ben)可以提供人(ren)蛋(dan)白(bai)質(zhi)組中(zhong)絕大部分組份。然而用蛋(dan)白(bai)質(zhi)組分析方法鑒定疾病(bing)標(biao)志物最大的挑戰(zhan)來(lai)自(zi)于血(xue)清中(zhong)大量的高(gao)豐度蛋(dan)白(bai)對檢測(ce)的干擾，血(xue)清中(zhong)有大約55%的蛋白為白蛋白，而IgG大約占血清中蛋白總量的10-25%，這些高豐度蛋白的存在會增加低豐度蛋白檢測的難度，去除占血清總蛋白近75%的白蛋白和IgG將有助于更好地鑒定其他的蛋白。G-Biosciences的AlbuminOUT™白(bai)(bai)蛋(dan)白(bai)(bai)去除試劑盒(he)堪稱白蛋白去(qu)除神(shen)器。血漿和腦脊髓液等樣本中，包含大量的白(bai)蛋(dan)白(bai)，從而封(feng)閉掉(diao)在二維(wei)凝膠(jiao)電泳中發現(xian)和鑒定其他低豐度蛋(dan)白(bai)的可能。AlbuminOUT™白蛋白去除試劑盒被設計用來在這種樣本中大量去除白蛋白。

這種白蛋(dan)(dan)白去除方法(fa)是基于(yu)白蛋(dan)(dan)白和Cibachron藍色染料的結合。AlbuminOUT™被優化從樣本中去除人的白蛋白。AlbuminOUT™使用快速離心柱方法，每個柱子含有0.2ml的染料結合樹脂，從而可以結合大于2mg的人白蛋白。AlbuminOUT™可以從5-50微升人血漿中去除大于98%的白蛋白。

離心柱形式可以(yi)在10分鐘內去除白蛋白。高結合力的藍色染料結合樹脂可以從人，豬，羊，狗，兔，大鼠和牛樣本中達到瞬間的結合和去除白蛋白。AlbuminOUT™或許也可以從其他物種中去除白蛋白。適用于處理25或50個樣本

Figure 1:  2D  analysis  of  whole  human  serum  before  (left)  and  after (right) treatment with AlbminOUT^™.

產品特點：

l 從樣(yang)本中不到10分鐘的時間內去除(chu)白(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)

l 基(ji)于白蛋(dan)白和Cibachron藍(lan)色染料(liao)的結合(he)

l 每個柱子的結合(he)力大于2mg的(de)人白(bai)蛋白(bai)

l 從(cong)5-50微(wei)升人血漿中去(qu)除大于98%的白蛋白

去垢劑如SDS、Tween、Tritonde等是蛋白樣品處理過程中常用的組分。去污(wu)劑在(zai)蛋(dan)(dan)白(bai)提取和樣本(ben)制備過程(cheng)中是(shi)很重要的物質，特別是(shi)研究疏水蛋(dan)(dan)白(bai)時。蛋(dan)(dan)白(bai)樣本(ben)中高濃(nong)度去污(wu)劑的存在(zai)能(neng)夠影響ELISA,IEF和蛋白的蛋白酶消化，以及用質譜進行分析時抑制肽的離子化。

所謂(wei)請神容(rong)易送神難。要(yao)除掉(diao)這些去垢(gou)劑？G-Biosciences推出的DetergentOUT™ GB-S10去污劑(ji)去除柱(zhu)子和樹脂專門設(she)計用來除于(yu)蛋(dan)白或其(qi)他(ta)生物(wu)樣(yang)本中所含有的去污(wu)劑，樹(shu)脂能夠從蛋白水溶液和(he)肽樣本中去除自(zi)由(you)的(de)，未結合的(de)陰離子的(de)，非離子或(huo)兩性(xing)離子的(de)去污劑(ji)(e.g. SDS, Triton® X-100 或CHAPS)，同時對于(yu)下(xia)游進(jin)行的(de)質譜或其他技術的(de)分析應用(yong)帶來最小的(de)樣本(ben)丟(diu)失。

DetergentOUT™ GB-S10柱(zhu)子在(zai)第三(san)方的研(yan)究使用中表明*兼容DI-QTOF和 LC-MS/MS（請(qing)見參考(kao)文(wen)獻）。DetergentOUT™ GB-S10柱子的使用顯著增加到了檢測到的肽光譜的數量。除此之外，DetergentOUT™ GB-S10柱子對于去污劑有高度的結合容量，比如每毫升固定的樹脂可以結合6mg SDS和14mg Triton® X-100。

常(chang)見去(qu)污劑的選(xuan)擇：

Table 1:  A comparison of the detergent removal rates and percentage protein recovery with DetergentOUT^™ GBS10.

華雅(ya)思創(chuang)生物(wu)—G-Biosciences全(quan)國授(shou)權代(dai)理

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