關于支原(yuan)體(ti)培(pei)養的(de)相關知識

支原體定義(yi)：

  支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)（mycoplasma）是(shi)一類(lei)沒有細胞壁、高度多形(xing)性、能通(tong)過濾菌器(qi)、可用人(ren)(ren)工培養基培養增(zeng)殖的最小原(yuan)(yuan)核細胞型微生物。由于能形(xing)成絲狀(zhuang)與分枝形(xing)狀(zhuang)，故稱為支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)。支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)廣泛(fan)存(cun)在于人(ren)(ren)和動物體(ti)內，大(da)多不(bu)致(zhi)病(bing)，對人(ren)(ren)致(zhi)病(bing)的支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)主要有肺炎支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)、溶脲脲原(yuan)(yuan)體(ti)、人(ren)(ren)型支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)、生殖器(qi)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)等。

支原體結(jie)構：

  支(zhi)原(yuan)體(ti)的(de)大小為0.1～0.3um，可(ke)通過濾菌器(qi)，常(chang)給細胞培養工作(zuo)帶來污(wu)染(ran)的(de)麻煩。菌落小（直徑0.1-1.0mm），在固體(ti)培養基表面(mian)呈*的(de)"油煎蛋"狀。無(wu)細胞壁(bi)，不能(neng)維持(chi)固定的(de)形(xing)態而(er)呈現多(duo)形(xing)性，對滲(shen)透壓敏感，對抑制細胞壁(bi)合成(cheng)的(de)抗生素不敏感。革蘭氏染(ran)色不易(yi)著色，故常(chang)用(yong)(yong)Giemsa染(ran)色法將(jiang)其染(ran)成(cheng)淡紫(zi)色。細胞膜(mo)(mo)(mo)中(zhong)膽(dan)固醇含量較多(duo)，約占36%，對保持(chi)細胞膜(mo)(mo)(mo)的(de)完整性具有一定作(zuo)用(yong)(yong)。細胞膜(mo)(mo)(mo)含甾醇，比其他原(yuan)核生物的(de)膜(mo)(mo)(mo)更堅韌。凡(fan)能(neng)作(zuo)用(yong)(yong)于膽(dan)固醇的(de)物質均可(ke)引起支(zhi)原(yuan)體(ti)膜(mo)(mo)(mo)的(de)破壞而(er)使支(zhi)原(yuan)體(ti)死亡。

   支原體基因組(zu)為一(yi)(yi)環狀(zhuang)以(yi)雙鏈DNA，分(fen)子量小（僅(jin)有大腸桿(gan)菌的五分(fen)之一(yi)(yi)），合成(cheng)與(yu)代謝很有限。

   肺炎支原體的一(yi)端有(you)一(yi)種特殊的末(mo)端結構（terminal structure），能(neng)使支原體粘附于(yu)呼吸(xi)道粘膜上皮細胞表(biao)面，與致病性(xing)有(you)關。

支原體分類：

  一般能(neng)(neng)分解(jie)葡(pu)(pu)萄糖的(de)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)則不能(neng)(neng)利(li)用(yong)精氨(an)酸，能(neng)(neng)利(li)用(yong)精氨(an)酸的(de)則不能(neng)(neng)分解(jie)葡(pu)(pu)萄糖，據(ju)此可(ke)將支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)分為(wei)兩類。解(jie)脲支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)不能(neng)(neng)利(li)用(yong)葡(pu)(pu)萄糖或精氨(an)酸，但(dan)可(ke)利(li)用(yong)尿素作能(neng)(neng)源(yuan)。

   各種支(zhi)原(yuan)體都有(you)特異(yi)(yi)的(de)表面抗原(yuan)結構，很少有(you)交叉反(fan)應(ying)，具有(you)型特異(yi)(yi)性。應(ying)用生長抑制(zhi)(zhi)試(shi)驗(yan)（Growth inhibition test,GIT）、代謝(xie)抑制(zhi)(zhi)試(shi)驗(yan)（Metabolic inhibition test,MIT）等可鑒定支(zhi)原(yuan)抗原(yuan)，進(jin)行分型。

   它廣泛(fan)分布(bu)于自然界(jie)，有80余(yu)種。與(yu)人(ren)類有關的支(zhi)原(yuan)體有肺炎支(zhi)原(yuan)體（M-pneumonie，Mp）、人(ren)型支(zhi)原(yuan)體（UU 分解尿(niao)素(su)支(zhi)原(yuan)體）和生殖器支(zhi)原(yuan)體（M.genitalium，MG）等。

   肺(fei)炎支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)引(yin)起肺(fei)炎。現已從人(ren)類(lei)泌(mi)尿生(sheng)殖(zhi)道(dao)分離出來7種支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)，其中分離率較高而(er)與(yu)泌(mi)尿生(sheng)殖(zhi)道(dao)疾病有關，是(shi)解脲支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)，其次是(shi)人(ren)型支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)。人(ren)型支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)（M.humenis，MH）、解脲支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)（Ureaplasma urealyticum，UU）和生(sheng)殖(zhi)器支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)（M.genitalium，MG）都(dou)會引(yin)起泌(mi)尿生(sheng)殖(zhi)道(dao)感染。

    自然界中廣(guang)泛(fan)存在絕大多(duo)數生(sheng)長需膽固醇，在遺傳上與(yu)細(xi)菌無關，且無論在什么條件(jian)下也不(bu)能變成細(xi)菌菌落較(jiao)小，0.1～0.3mm。

培養條件(jian)：

  營養要求比一般細菌高，除基礎營養物(wu)質外還需加入10～20%人或動物(wu)血清以提供支原體(ti)所需的膽(dan)固醇(chun)。最適pH7.8～8.0之(zhi)間(jian)，低于(yu)7.0則死(si)亡，但解脲支原體(ti)最適pH6.0～6.5。

   大多數兼性厭(yan)氧(yang)，有些菌(jun)株在(zai)(zai)(zai)初分(fen)離時加入5%CO2生長更(geng)好。生長緩慢，在(zai)(zai)(zai)瓊脂含量較(jiao)少的固(gu)體(ti)培養基(ji)上(shang)孵育(yu)2～3天出(chu)現典型的“荷包(bao)蛋樣"菌(jun)落：圓(yuan)形(xing)（直徑10～16um），核(he)心部分(fen)較(jiao)厚，向下長入培養基(ji)，周邊(bian)為一層薄的透明顆粒區。此外，支原體(ti)還能在(zai)(zai)(zai)雞胚絨毛(mao)尿囊膜或培養細(xi)胞中生長。