產品名稱：CellArtis Y30021 人 iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統

產品貨號：CellArtis Y30021

產品品牌：TAKARA/ CellArtis

英文名稱：Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit

人 iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統 現貨供應，歡迎咨詢

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從開始到結束：人iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統

人誘(you)導(dao)多能(neng)干(gan)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)（Human induced pluripotent stem cells，hiPSCs)是一個(ge)功能(neng)強大的(de)研究(jiu)(jiu)工具和疾(ji)病模型(xing)，因(yin)為其(qi)具備增殖(zhi)、自我(wo)更新、分化為多種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)類(lei)型(xing)的(de)能(neng)力。此外，人iPS細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)還可(ke)以(yi)再現細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)來源(yuan)個(ge)體的(de)疾(ji)病表(biao)型(xing)和基(ji)因(yin)型(xing)。將人iPS細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)結合基(ji)于CRISPR/Cas9的(de)基(ji)因(yin)編輯技(ji)術(shu)，可(ke)以(yi)在同基(ji)因(yin)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)系中研究(jiu)(jiu)特定基(ji)因(yin)改變(bian)引起的(de)功能(neng)影響(xiang)，因(yin)為基(ji)因(yin)編輯過的(de)人iPS細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)能(neng)提供可(ke)再生的(de)、無(wu)遺傳變(bian)異的(de)患(huan)病細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和健康細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)資源(yuan)。

CRISPR/Cas9系統已經(jing)成為一個(ge)(ge)強大(da)的基(ji)因編輯工(gong)具(ju)，因為其高的靶向(xiang)(xiang)特(te)異性(xing)，編輯效(xiao)率和易用性(xing)。該技(ji)術的強大(da)主(zhu)要源于(yu)它的簡(jian)單，因為全部只需要一個(ge)(ge)Cas9核酸酶結(jie)合一個(ge)(ge)單鏈向(xiang)(xiang)導RNA（single guide RNA，sgRNA) 就可(ke)以決定靶向(xiang)(xiang)特(te)異性(xing)（Jinek et al. 2012)。這種(zhong)RNA編程的（RNA-programmable）方(fang)法利(li)用了非同源末(mo)端連接(non-homologous end joining，NHEJ) DNA修復途徑(jing)的易錯特(te)性(xing)，進而產生基(ji)因敲除(通(tong)(tong)過插入/刪除)。這種(zhong)方(fang)法也可(ke)以通(tong)(tong)過同源重組（homology-directed repair，HDR)途徑(jing)被(bei)用于(yu)基(ji)因敲入。

CRISPR/Cas9系(xi)統的(de)組件可以(yi)通過多種方法成功導入至靶細胞，包括基(ji)于(yu)載體(ti)的(de)表達系(xi)統，RNA轉染, 導入Cas9/sgRNA核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP)復合物(Sander and Joung 2014)等(deng)。與(yu)基(ji)于(yu)載體(ti)的(de)方法相(xiang)比(bi)，直接導入Cas9/sgRNA RNPs提供了(le)一種快速轉入基(ji)因編輯實驗的(de)方法，同(tong)時脫靶效應的(de)可能性更小(xiao)（Kim et al. 2014)。

一(yi)旦Cas9/sgRNA RNP復合物(wu)被(bei)(bei)導(dao)入，為了分離(li)和(he)(he)篩選感興(xing)趣的基(ji)因(yin)型，單細(xi)(xi)胞(bao)必須被(bei)(bei)分離(li)并擴增(zeng)(zeng)為克(ke)(ke)隆(long)(long)細(xi)(xi)胞(bao)系。傳(chuan)統上,從基(ji)因(yin)編輯的hiPS細(xi)(xi)胞(bao)建立(li)一(yi)個(ge)克(ke)(ke)隆(long)(long)群是低效(xiao)的、具(ju)有(you)挑(tiao)(tiao)戰性的和(he)(he)耗時的，因(yin)為hiPS 細(xi)(xi)胞(bao)是以集(ji)(ji)落生長和(he)(he)傳(chuan)代(dai)的。通常，這(zhe)會導(dao)致細(xi)(xi)胞(bao)死亡和(he)(he)提前分化。然而，Cellartis單細(xi)(xi)胞(bao)克(ke)(ke)隆(long)(long)系統包(bao)含(han)一(yi)個(ge)成分確定的培養(yang)(yang)系統(由基(ji)礎(chu)培養(yang)(yang)基(ji)，包(bao)被(bei)(bei)劑，和(he)(he)添加劑組成)，用于(yu)(yu)有(you)效(xiao)形成單細(xi)(xi)胞(bao)克(ke)(ke)隆(long)(long)和(he)(he)擴增(zeng)(zeng)基(ji)因(yin)編輯后(hou)的hiPSC克(ke)(ke)隆(long)(long)。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一(yi)個(ge)基(ji)于(yu)(yu)單層培養(yang)(yang)的系統，規(gui)避了集(ji)(ji)落狀培養(yang)(yang)帶來的挑(tiao)(tiao)戰，允(yun)許(xu)單細(xi)(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)和(he)(he)促進接(jie)種的單細(xi)(xi)胞(bao)存活和(he)(he)后(hou)續擴增(zeng)(zeng)。

Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是(shi)一個(ge)完整的，在無飼養層(ceng)和成分確(que)定條(tiao)件下，用(yong)于(yu)hiPSCs有(you)效(xiao)擴增(zeng)(zeng)(zeng)和擴大生產的系(xi)統。試(shi)劑盒包含了從接種單(dan)(dan)細(xi)胞至96孔(kong)板(ban)到(dao)擴增(zeng)(zeng)(zeng)至48孔(kong)板(ban)過(guo)程中所有(you)必要的試(shi)劑。單(dan)(dan)細(xi)胞克隆擴增(zeng)(zeng)(zeng)后(hou)，hiPSCs可以使(shi)用(yong)Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續(xu)培(pei)養。

產品特點：

1.成分確定的，無血清，無飼養層培養

2.All-In-One型: 培(pei)養(yang)基(ji)+添加劑(ji)+包被劑(ji)維持(chi)良(liang)好的多能(neng)性狀態，背景分化低(di)

3.細(xi)胞非(fei)集落狀均勻生長，輕松單細(xi)胞傳(chuan)代

4.單個干細胞基因(yin)操(cao)作實驗的理想選擇

產品名稱：人 iPS細胞基因編輯和單細胞克隆系統

產品貨號：CellArtis Y30021

產品品牌：TAKARA/ CellArtis

英文名稱：Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit

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CellArtis           Y40002            NDiff® 227

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CellArtis           Y30047            Cellartis®; DEF-CS™ 500 Xeno-Free 3D Spheroid Culture Medium w/o antibiotics

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